染色体核型分析是以分裂中期染色体为研究对象,根据染色体的长度、丝点位置、长度和短臂的比例,根据染色体结构和数量的变化,对染色体进行分析、比较、排序和编号。核型分析可以为细胞遗传分类、物种之间的关系以及染色体数量和结构变化的研究提供重要的基础。
分析方法:
在镜下选择染色体分散度适中(不过分散和相互重叠),染色体长度适宜,染色分裂相清晰,在油镜下观察。
1.计数
根据其自然位置,将一个细胞中的所有染色体划分为几个社区。为了防止重数或漏数,可以在镜下画一个简单的图表,然后计数,以确定是否有无数异常。人体正常体细胞2n=46,其中常染色体22对,性染色体1对,正常男性核型表达46,XY,女性核型表达46,XX。
2.观察染色体的形态结构,确认随体
观察染色体的形态结构,确认每条染色体的两条染色单体有丝状颗粒、长臂和短臂以及一些染色体的短臂端。
3.识别染色体的类型
每个染色体包含两个染色单体,通过丝粒相互连接。从丝粒延伸到两端的染色体结构称为染色体臂。染色体臂分为长臂和短臂。根据丝粒的不同位置,人类染色体可分为三类:中央丝粒染色体,长臂和短臂几乎相等;长臂和短臂可以明显区分亚中心的丝粒染色体;近端丝粒染色体,短臂极短,丝粒几乎位于染色体顶部。在显微镜下观察染色体的形态结构、次要悬挂位置以及是否存在结构变形,如断裂、丢失、重复、易位、倒置、环形等。
4.判断性别
根据Y染色体是否判断性别。G组染色体为5(2(2L,22对+Y),即男性。G组有4个(21,22对),是女性。染色体可以用不同的颜色标记,根据ISCNL978的规定进行配对,并在记录簿中描述。习惯上先描述G组来判断性别,然后找D、E、F、A、B组,最后分析C组。然后一个一个仔细看,观察每个染色体的结构是否异常。如果有结构和数失真,应记录哪种类型的失真和失真部位的染色体编号,单臂或双臂。
5.剪贴核型照片
根据ISCN规定的每组和每个染色体的结构特征进行分组和排列,依次找出A、B、D、E、F、C组,最后确定C组,即在每个染色体旁边用铅笔标出其组号;然后剪下每个染色体,按大小顺序排列每组染色体;最后,将染色体排列在染色体核型分析表的相应位置。粘贴时,染色体的短臂应放在上面,长臂应放在下面,丝粒应放在一条直线上。切割过程应小心,以防止染色体丢失。
6.拍照,并进行核型分析。
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